’段）。血液溶漿機米氏方程式的推導以兩個假設為前提：!穩(wěn)態(tài)觀念，當酶促反應趨于穩(wěn)態(tài)時 ()的生成速率與分解速率相等。"酶促反應中［)］大大高于［(］，因此［)］的變化在反應過程可忽略不計。反應式中 !"、!+和 ! 代表各反應的速率常數(shù)。鑒于反應過程中，不斷有一部分 (與 )結合生成 ()，故游離酶濃度為總酶濃度(,) ［(］中減去生成 ()中的酶濃度，即［游離酶］=［(］［()］，這樣 ()生成速率 = !"［(］［()］·（,）（）［)］()分解速率 = !［+()］* !［()］（#） ,$$當反應處于穩(wěn)態(tài)時，()生成速率 = ()分解速率，即 （［(］［()］）·［)］［()］* !［()］!"= !+,（［(］［()］）［)］!+* ! , ［()］ = !" $$設 !+ !*" ! ,= #> $$ #>則［)］［()］［)］= #>為米氏常數(shù)，［(］［()］ $$整理后［()］=［ #>(］*［［))］］（!） $$由于反應速率 " = !［()］（C） , 第五章 !酶!"!!!將（"）式代入（#）式： ［&］! $ "#%()［［ ’’］］ （*） !!當［’］很高時，所有 &都與 ’生成 &’，反應達最大反應速率，此時［&］$［&’］，即 !(+, $ " %［&］［&’］$ " %（-） !!將（-）式代入（*）式，即得米氏方程式： !(+,［’］! $ #()［’］ !!（三） #(和 !(+,的意義 ! !./當 ! $ !(+, ，即反應速率為最大速率一半時，米氏方程為： 0!(+, !(+,［’］ 0$ #()［’］ 1! #($［’］ !!這表示 #(值等于酶促反應速率為最大反應速率一半時的底物濃度。 ! !0/一些酶
的 " 0 8" %，即 &’解離成 &和 ’的速率明顯超過分解成 &和 2的速率， " %可忽略不計，則 #( $ "" 0 ，即此時 #(近似 &’的解離常數(shù) #3。在這種情況下 #(可表示酶對底物的親和力。 ." 0 ［&］［’］#($ " $［&’］ $ #3 . !! #(值愈小，酶和底物親和力愈大，這表示不需要很高的底物濃度就可達到最大反應速率。但并非所有酶促反應中 " %都遠小于 " 0，所以 #3值和 #(值涵義不同。 ! !%/ #(值是酶的特征性常數(shù)，它與酶的結構，酶所催化的底物和反應環(huán)境如溫度、 45、離子強度等有關，而與酶濃度無關。 #(的單位是 (67 8 9，大多數(shù)酶的 #(值在 .: # ;.: 0(67 89之間，不同種類酶的 #(值不同（表 "-）；如一種酶有多個底物，則酶對每一種底物都有其各自特定的 #(。表 ! "#某些酶的 !$值酶!名!稱底!!物 #( （8((67·9.）過氧化氫酶 50<0 0"碳酸酐酶 50=<%>胰糜蛋白酶甘氨酰酪氨酰甘氨酸 .:!半乳糖苷酶 ?乳糖 @/ :己糖激酶 ?果糖 ./ " AB2 :/@ ?葡萄糖 :/ :." ! !@/ !(+,是酶被底物完全飽和時的反應速率。 !!當［&’］等于總酶濃度［&B］，即酶被底物完全飽和時： ［&B］!(+, $ " %!!如果知道酶的總濃度和 !(+,，即可計算出酶的轉(zhuǎn)換數(shù)（CDEF6GHE FD(IHE）：當酶被底物完全飽和時，單位時間內(nèi)每個酶分子（或活性中心）催化底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物的分
子數(shù)。 #"!第一篇 (生物分子的結構與功能" #$%!!" ［&’］ (( !!即為酶的轉(zhuǎn)換數(shù)，大多數(shù)酶的轉(zhuǎn)換數(shù)在（) *)+,）-.之間。 ((（四） ##和 " #$%的測定 ((從圖 / ),中可知，由于底物濃度對反應速率影響呈矩形雙曲線，難以從該圖中準確測得 " #$%和 ##。如將米氏方程兩側(cè)取倒數(shù)處理，便得到下面方程式： )##))" " " #$% ［0］1 " #$% (((((圖 / )/(雙倒數(shù)作圖法圖 / )2( 3$45.作圖法 (((( ((以 )"對［)0］作圖，可得直線圖（圖 / )/），稱林貝氏（674585$95: ;<:=）作圖或雙倒數(shù)作圖。從此圖>）。三、 !"對酶促反應速率的影響 ((酶分子中有許多可解離的基團，其在不同 ?3條件下解離狀態(tài)不同，所帶電荷的數(shù)量和種類也不同。一種酶通常在某一 ?3時的解離狀態(tài)最有利于酶的正確的空間構象的形成。酶催化活性最大時的環(huán)境 ?3稱為酶促反應的最適 ?3（ @?A B7#<# ?3）。此時酶的各個必需基團的解離狀態(tài)，包括輔酶及底物的解離狀態(tài)適合酶發(fā)揮最大活性。各種酶的最適 ?3不同（圖 / )C）。動物體內(nèi)酶的最適 ?3在 2D/ *C之間，接近中性。但少數(shù)酶也有例外，如胃蛋白酶的最適 ?3為 )D C，精氨酸酶的最適 ?3為 ED C。 ((最適 ?3不是酶的特征性常數(shù)，它受底物濃度，緩沖液的濃度和
